一、影像學檢查
1.B超檢查 為診斷胰腺癌的首選方法及在普查中的篩選方法。檢查時應注意胰頭的大小。如超聲測量胰頭部厚度大于30mm（絕大多數男性胰頭超聲值小于30mm，女性小于28mm）,胰體厚度大于25mm者（正常男性小于22mm，女性小于20mm），應進一步追蹤檢查。可見低回聲實性占位。胰體外形不規則，能發現2cm以上的腫瘤，還能發現胰管擴張、膽管（肝內或/和肝外）擴張、膽囊腫大以及肝內轉移灶等。對3cm左右的胰癌陽性率可達80%。
2.纖維胃鏡的超聲檢查 在胃鏡頂端裝上超聲探頭，緊貼胃后壁對胰腺作全面檢查不受氣體干擾，大大提高了胰腺癌的診斷率，可清晰地顯示胰腺結構，發現早期病變。
3.CT檢查 CT掃描可以顯示胰腺腫瘤的正確位置、大小及其與周圍血管的關系，并能發現直徑約1cm的腫瘤，若能增強掃描，或使一些平掃難以確定的病灶顯示得更加清楚，在增強的胰實質內可見到低密度的不規則的病灶，借此檢查可以進行分期，以利判斷手術方式和預后。目前CT已成為診斷胰腺癌的主要方法。CT診斷胰腺癌的準確率可達98%。
4.磁共振成像（MRI） 可顯示胰腺輪廓異常，根據T1加權像的信號高低，可以判斷早期局部侵犯的轉移，對判斷胰腺癌，尤其是局限在胰腺內的小胰癌以及有無胰周擴散和血管侵犯方面，MRI優于CT掃描，是胰腺癌手術前預測的較好方法。
5.內鏡下逆行胰膽管造影（ERCP） 對胰腺癌的診斷具有較高的特異性。除顯示主胰管狹窄，充盈缺損和閉塞外，還可以清晰地觀察到胰管狹窄的形態改變。可檢查出腫瘤小于2cm的胰管病變，是診斷小胰癌的有效方法。
6.選擇性血管造影（SAG） SAG是一種損傷檢查，但在腫瘤1cm時即可做出診斷。能顯示胰腺周圍動脈的形態，對判斷腫瘤有無血管侵犯重要意義。如動脈不規則狹窄、閉塞，并可根據異常的血管區域推測腫瘤的大小。還可根據SAG所見判斷腫瘤手術的可能性和選擇手術方式。判斷手術能否切除很重要的就是有封鎖動脈浸潤。在平常影像學結果不能明確診斷時選用，準確率高于90%。
7.子母胰管鏡檢查 是最近研制和開展的一種新方法，其子鏡（胰管鏡）直徑僅為1mm，不必行十二指腸乳頭切開術，是由母鏡（纖維十二指腸鏡）插入胰管內，直接觀察管內情況。胰腺癌時粘膜隆超、發紅、狹窄、閉塞等。但該鏡目前尚存在管徑太細易折損，前端不能改變方向，不能取活檢。但經過若干年后有可能成為診斷胰腺癌的主要手段。
二、腫瘤標記物
自1979年Koprowski等發現與消化道腫瘤相關抗原CA19-9以來，由于單克隆技術的開發取得了突飛猛進的發展。目前發現與胰腺癌相關的腫瘤標記物有10多種，臨床常用的除CA19-9外，還有CA50、Span-1、Dupan-2、POA、CEA等。目前國內所用的試劑多為進口的，較昂貴，多數醫院尚未能普及。但腫瘤標記的檢測對胰腺癌的篩選、診斷術后復發及轉移的監測，以及胰腺良惡性腫瘤的鑒別都有著重要作用。若用兩種或兩種以上的腫瘤標記物檢查可提高其陽性率。
1.CA19-9 是胰腺癌的相關抗原，其表達依賴于lewis血型抗原的表達，lewis陰性者，CA19-9的檢查也為陰性。CA19-9診斷胰腺癌的敏感性、特異性和準確性分別為83.1%、73%、75%，而小胰腺癌病人CA19-9的水平不高，小于2cm的腺癌陽性率僅60.7%，而腫瘤較大的病人CA19-9的水平較高，陽性率達80%以上，分界值定為120kU/L，高于此值者高度懷疑胰腺癌。同時還可以判斷預后，腫瘤切除后CA19-9降至正常值，血清臨界值為30kU/L者預后較好，如果腫瘤復發、轉移或病情惡化可見CA19-9的再度明顯升高。故CA19-9是胰腺癌的有效標記物。
2.CA50 也是lewis系統的一個抗原，與CA19-9有很好的相關性，不必同時將這兩個抗原一起測定。但若將CA50和CA242聯合檢測可提高對胰腺癌診斷的敏感性。
3.Span-1 腺癌病人可高達1 446KU/L。其敏感性為81%，特異性為68%，但對于小胰腺癌的診斷不理想，小于2cm的腫瘤陽性率僅為56%。
4.Dupan-2 其臨界值為400KU/L，對胰腺癌的敏感性為50%～70%，與CA19-9聯合檢測可使陽性率提高到95%，膽受肝功能的影響，與GOT有密切相關。
上述這些標腫瘤記物，尚不能廣泛開展，特異性偏低，對早期癌和小胰腺癌（<2cm的腫瘤）陽性率更低，尚存在一定的假陽性和其他腫瘤的交叉反應。聯合應用對篩選胰腺癌的高危人群和判斷預后復發有一定的積極作用。
5.CEA（癌胚抗原） 陽性率78.9%，對于低分化腺癌>3cm腫瘤以及臨床Ⅳ期的胰腺癌陽性率明顯提高，CEA陰性者平均生存期為38.6個月，比陽性者明顯延長，可以用來判斷預后。
三、癌基因檢測
1.Yas基因 胰腺癌有高頻率的C-Ki-ras基因第12密碼子的點突破，而胰腺其它疾病不具有這種標志性改變。C-Ki-ras第12密碼子在胰腺癌中有很高的發生率，用PCR（核酸雜及聚合酶反應），輔以寡核苷酸雜交或PCR產物檢測胰腺組織C-Ki-ras癌基因第12密碼子點突變，可能成為胰腺癌診斷與鑒別診斷的可靠分子生物學手段。有報道在已確診的19例胰腺癌中，18例有該基因第12密碼子的突變，陽性率為94.7%，與國外相一致（12例均為陽性，達100%）。而非胰腺癌病例（如胰島素瘤、壺腹癌、胃癌、膽囊癌等共17例）均為陰性。這種基因突變的檢測，可用來早期診斷胰腺癌和鑒別診斷。
2.C-erbB-2基因 該基因產物表達在胰腺部中陽性率高，并與腫瘤大小及預后有關。
3.P21 抑癌基因在胰腺癌中表達率高,具有特異性, 有明顯的診斷價值。對胰腺的良、惡性腫瘤的鑒別有意義。

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