(續(xù)前)
2.2 鱉魚軟骨結(jié)構(gòu)糖組分的GC分析
鯊魚軟骨舍有相當(dāng)數(shù)量的蛋白多糖(黏多糖)和糖蛋白,據(jù)報(bào)道,它們多具一定免疫功能,而且鯊魚軟骨的血管生成抑制因子屬于糖蛋白類。因而可認(rèn)為它們蘊(yùn)含有效成分。通過對蛋白多糖和糖蛋白結(jié)構(gòu)中的中性糖與氨基糖組分的分析探討,建立鯊魚軟骨制品的一種特征性檢測方法,作為質(zhì)量監(jiān)測的主要手段
采用硫酸-甲醇溶液對鯊魚軟骨樣品進(jìn)行甲醇解反應(yīng),將糖蛋白或蛋白多糖的糖鏈與結(jié)合蛋白質(zhì)解離,并水解為單糖的甲基糖苷,再經(jīng)乙酰化制備可揮發(fā)性衍生物,供GC分析,鯊魚軟骨(原料)的GC譜圖如圖2(略)所示,典型的鯊魚軟骨制品GC譜圖與之一致。
由于本方法預(yù)處理?xiàng)l件抑制了蛋白質(zhì)的水解、顯現(xiàn)的GC峰譜單糖突出,主要糖組分為木糖、半乳糖、葡萄糖、N-乙酰氮半乳糖、N-乙酰氨基葡萄糖、N-乙酰神經(jīng)氨酸。其中半乳糖與葡萄糖成并肩又峰形狀,峰高相近,而N-乙酰氮半乳糖與N-乙酰氨基葡萄糖雙峰峰面積之比約為1:3。這種“糖譜’表達(dá)了鯊魚軟骨的部分結(jié)構(gòu)信息,譜圖本身又具有直觀性,方法的干擾因素很少,可望成為鯊魚軟骨制品定性鑒別的可靠手段。個(gè)別制品人為添加硫酸軟骨素,從GC譜圖上可看到己糖雙峰和氨基己糖雙峰的比例明顯失常,這是其它方法難以覺察的
2.3 鯊魚軟骨氨基酸成分的特點(diǎn)
鯊魚軟骨有機(jī)成分含量最高是蛋白質(zhì),它含有某些活性物質(zhì)仍是生物醫(yī)學(xué)界熱心研究的課題。這些蛋白質(zhì)以膠原纖維蛋白所占比例最大、膠原的氨基酸組成有一個(gè)特點(diǎn),即甘氨酸含量列第一位,約占總氨基酸的30% :脯氨酸(Pro)含量列第二位。
實(shí)驗(yàn)中,研究者檢測鯊魚軟骨所含18種氨基酸,結(jié)果:甘氨酸含量第一,約占20%;脯氨酸列第三,約占11%;谷氨酸精氨酸分列第二和第四位。研究人員收集的鯊魚軟骨制品,除一種異常外,氨基酸含量排列次相同,比例相似。
鯊魚軟骨氨基酸量比序列的這種特征為其制品的監(jiān)測提供了又一種有效手段。研究人員采集了商品中,有一名為“鯊?fù)?rdquo;者,GC分析發(fā)現(xiàn)它的糖組分偏低,而氨基酸分析又顯示其量比序列反常,說明該產(chǎn)品不是純的鯊魚軟骨粉。
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