菊科植物驅蟲斑鳩菊(Vernonia anthelmintica Willd)為菊科斑鳩屬一年生草本植物,主要分布于印度、巴基斯坦及我國新疆等地。收載于《中華人民共和國衛生部藥品標準·維吾爾藥分冊》,維吾爾語稱卡力孜然,藥用部位為該植物的成熟瘦果,具有清熱、消炎、活血化瘀、殺蟲祛斑的作用,維吾爾族民間常用此治療白癜風。文獻報道驅蟲斑鳩菊在體外有抗腫瘤活性,吳劍飛等報道驅蟲斑鳩菊中所含成分斑鳩菊大苦素、斑鳩菊醇對P388白血病細胞有抑制作用;Lambertini E.等報道驅蟲斑鳩菊提取物對乳腺癌細胞的增殖有抑制作用等。黑色素瘤(melanmoa)化療有效率低于25%。國外主要以免疫治療和基因治療為主。本研究旨在為惡性黑色素瘤的治療提供新的理論和實驗依據。
目的
探討驅蟲斑鳩菊提取物對人惡性黑色素瘤A375細胞的增殖以及對其酪氨酸酶活性和黑色素含量的影響。
方法
四甲基噻唑氮藍比色法測定對A375細胞抑制作用;顯微法觀察細胞形態;比色法測定酪氨酸酶活性和黑色素含量。
結果
在一定質量濃度范圍(1~4O mg/L)內隨著驅蟲斑鳩菊提取物質量濃度增加可抑制黑色素瘤細胞的增殖;驅蟲斑鳩菊提取物質量濃度小于10 mg/L,對酪氨酸酶活性和黑色素合成抑制有增加的趨勢;大于20mg/L時,顯示一定的細胞毒性作用。
結論
驅蟲斑鳩菊提取物能顯著抑制惡性黑色素瘤A375細胞的增殖,在一定質量濃度范圍內(1~40mg/L)有濃度依賴關系(P< 0.05)。
討論
本研究顯示,驅蟲斑鳩菊提取物能夠顯著抑制人惡性黑色素瘤A375細胞的增殖,且抑制作用隨質量濃度的升高而逐漸增強。
MTT法、生長曲線法是觀察體外抗腫瘤活性的常用方法。MTT法快速簡便,常用于抗腫瘤藥的體外初篩試驗。本研究采用2種試驗方法的聯合應用增加了試驗結果的可靠性。
試驗結果也發現用藥物干預后細胞形態變化不大,對人惡性黑色素瘤A375細胞合成黑色素及酪氨酸酶活性在低質量濃度(1~10 mg/L)時有促進作用,但不明顯。高質量濃度對A375細胞表現出細胞毒作用,從而抑制了酪氨酸酶的分泌和黑色素的合成。此方面有待于進一步的研究。
驅蟲斑鳩菊提取物抗腫瘤作用的物質基礎尚不明確,現報道有抗腫瘤活性的主要為萜類和內酯類化合物。