環孢素A對早孕期人細胞滋養細胞titin表達的調控作用

　　環孢素A（新山地明）是目前公認的抑制移植排斥反應最為有效的藥物之一，自20世紀70年代應用于臨床以來，作為免疫抑制劑發揮了極其重要的作用。正常生理妊娠類似于同種異體移植，胚胎作為自然的同種移植物不受母體免疫排斥是免疫排斥現象的唯一例外，實際上反映母體對胚胎的免疫耐受。而妊娠失敗多因母體對胚胎的免疫排斥所致。

　　環孢素A研究通過原代培養早孕期人細胞滋養細胞及JAR滋養細胞株，在CsA作用下，研究環孢素A對早孕期人細胞滋養細胞titin表達的調控作用，為妊娠疾患的治療提供線索。

環孢素A（新山地明）對早孕期人細胞滋養細胞titin表達的調控作用

　　目的 探討CsA對早孕期人細胞滋養細胞titin表達的調控作用

　　方法 Western blot觀察pERK1/2的表達；ELISA分析MAP激酶活性；RT-PCR、Western blot檢測MEK特異性抑制劑U0126預處理或不預處理后CsA對細胞滋養細胞titin mRNA的轉錄及蛋白表達的影響。

　　結果

　　（1）CsA以時間和濃度依賴方式活化早孕期人細胞滋養細胞MEK激酶、促進ERK1/2磷酸化，U0126預處理則抑制其基礎和CsA誘導的MAPK激酶活化和ERK1/2磷酸化。

　　（2）CsA以時間和濃度依賴方式誘導早孕期人細胞滋養細胞titin mRNA的轉錄，1.0μmol/LCsA處理72h可誘導titin蛋白的表達。

　　（3）U0126呈劑量依賴性地抑制CsA誘導的早孕期人細胞滋養細胞titin mRNA的轉錄。

　　（4）相關性分析顯示CsA對滋養細胞生物學功能調控與其誘導滋養細胞titin表達有關。

　　結論

　　（1）CsA呈時間劑量依賴方式活化MAPK/ERK1/2信號通路，促進早孕期人細胞滋養細胞titin的表達。

　　（2）CsA通過誘導滋養細胞表達titin參與調控其生物學功能。

　　通過環孢素A的系列實驗結果表明：

　　（1）胰蛋白酶/DNase Ⅰ分步消化，Percoll密度梯度離心法分離純化滋養層細胞，方法簡便可靠。CD133-2/AC141是鑒定細胞滋養層細胞的可靠分子。

　　（2）CsA一方面活化MAPK/ERK1/2信號通路促進人細胞滋養細胞增殖、遷移能力與侵襲性、抑制其凋亡，；另一方面抑制Ca2+/Calcineurin/NFAT信號通路促進人滋養細胞遷移能力和侵襲性。

　　（3）CsA通過MAPK/ERK1/2信號通路活化轉錄因子AP-1、NF-κB，調控滋養細胞的體外生物學行為。

　　（4）CsA通過活化MAPK/ERK1/2信號通路誘導滋養細胞titin表達。

　　（5）CsA誘導滋養細胞表達titin調節滋養細胞生物學行為。

　　為CsA可能成為防治反復自然流產、妊娠高血壓綜合征等妊娠并發癥的潛在藥物提供了理論依據及有用線索。

參考文獻：

①杜美蓉，《環孢素A對滋養細胞生物學功能及其信號轉導的調節作用》。復旦大學，2005.

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