中藥抗HBV和HCV研究新進展

    通常，抗病毒藥物針對病毒生命周期中的各個環節，包括病毒進入細胞、病毒蛻殼并進入受感染細胞核、轉錄和復制、裝配等。例如對于HBV來說，除了干擾素-α（IFN-α）主要起免疫調節，并對病毒蛋白合成的抑制起作用外，廣泛應用的核苷（酸）類似物只針對DNA聚合酶起到抑制病毒復制的作用。考慮到HBV對已有的核苷（酸）類似物均具有耐藥現象，故開發新的靶位或作用環節的藥物具有十分重要的意義。目前發現，一些新的中草藥提取物可有效抑制病毒復制而無嚴重肝毒性，特簡介如下。 

    賽菊寧黃質（Helioxanthin） 

    柳杉屬喬木，其根皮、樹皮和枝葉具有解毒、殺蟲、止癢及清熱解毒作用。賽菊寧黃質是從柳杉中提取的一種活性成分。Ying等研究了賽菊寧黃質類似物8-1在穩定產生HBV的肝癌細胞中的抗病毒效應后發現，賽菊寧黃質類似物8-1可抑制HBV RNA和蛋白表達以及野生型和拉米夫定（LAM）耐藥病毒株的DNA復制。Ying等進一步分析發現該藥通過降低肝細胞核因子（HNF）4α和HNF3β水平抑制HBV啟動子活性。HNF4α和HNF3β在轉錄后受到影響，但HBV RNA和蛋白質的未定型均無影響。這種影響主要發生在儲存病毒的細胞中，這表明HBV可能致敏細胞且藥物可選擇性清除被感染的肝細胞。 

    臺灣的一項研究發現，一種賽菊寧黃質（HE-145）可抑制肝癌細胞中HBV的基因表達及復制。研究結果顯示，HE-145能在肝臟組織特異性地抑制HBsAg啟動子Ⅱ（SPⅡ）和核心啟動子（CP），而對HBsAg啟動子Ⅰ（SPⅠ）和X基因啟動子（XP）無抑制作用。體內試驗表明HE-145抑制HBV核心啟動子轉錄復合物的形成。由此推測，HE-145可能代表一類新型抗HBV藥物，它們選擇性地調節人體肝細胞的轉錄而抑制HBV基因表達和復制。 

    最近，Janmanchi等研究了賽菊寧黃質亞甲二氧基及內酯環修飾物的抗HBV活性，在合成并分析了一系列賽菊寧黃質類似物后發現32號化合物是最有效的抗HBV藥物。它抑制HepA2細胞株HBsAg和HBeAg的產生；同時抑制野生型和LAM耐藥型HBV的復制、轉錄及核心蛋白的表達。進一步的研究發現32號化合物選擇性地抑制HBsAg、核心抗原和增強子Ⅰ等病毒啟動子的活性。這種類型的化合物具有獨特的作用模式，與現有的治療藥物不同，從而成為新的潛在抗HBV藥物。 

    苦味葉下珠（Phyllanthus Amarus） 

    植物苦味葉下珠屬大戟科油柑屬，為一年生草本植物，雌雄同株。其味苦，性涼，具有平肝清熱、利水解毒等功效，可應用于治療泌尿生殖系、婦科、呼吸系統等疾病。今年研究顯示，苦味葉下珠在體外可抑制HBV RNA轉錄，也表現出在慢性HBV攜帶者中治療的潛力。Ott等發現該藥通過減少C/EBP與HBV DNA的結合，特異性抑制HBV Enh Ⅰ的活性。 

    最近，Ravikumar等研究發現苦味葉下珠根的提取物可顯著抑制HCV NS3蛋白酶，苦味葉下珠葉的提取物在體外對HCV NS5B聚合酶具有抑制作用。此外，苦味葉下珠根及葉的提取物可明顯抑制HCV單順反子復制子、HCV（H77S）RNA在培養細胞中的復制，且在Huh7肝癌細胞中用MTT法檢測并未顯示出細胞毒性。同時，研究發現苦味葉下珠根聯合IFN-α在抑制HCV RNA復制方面具有協同作用。上述結果表明，苦味葉下珠具有抑制病毒活性的分子基礎及體外效應，成為開發新型抗病毒藥物的天然來源。 

    姜黃屬（Curcuma） 

    姜黃屬屬于姜科，自然界已發現50余種，分布于亞洲東南部，國產本屬植物的根莖及膨大的塊根均可供藥用，具有行氣解郁、破瘀止痛等作用。Kim等證實姜黃屬提取物在穩定產生HBV的HepG2.2.15細胞中有抗病毒作用。它可降低HBV RNA水平，從而抑制HBV抗原表達及病毒顆粒的產生。該提取物通過加強p53基因的轉錄和穩定性，導致P53蛋白的積聚，從而具有潛在抗病毒及抑制癌變作用。 

    姜黃屬是從姜科、天南星科中的一些植物的根莖中提取的一種化學成分，是植物界很稀少的具有二酮的色素，為二酮類化合物。Rechtman等研究顯示，天然酚類化合物姜黃素可有效抑制在肝癌細胞中穩定轉染的HBV基因表達和復制，這種抑制作用通過下調饑餓誘導蛋白（PGC-1α）得以實現。姜黃素與LAM聯合應用還具有以抑制HBV逼到的協同效應。研究結果提示，姜黃素可能作為以感染宿主為目標的靶向療法，成為區別于與當前病毒靶向療法的另一有效途徑。 

    黃岑（Radix Scutellariae） 

    黃岑為唇形科植物，以根入藥，含有黃岑苷元、黃岑苷、漢黃岑素、漢黃岑苷和黃岑新素等，具有顯著的生物活性。Guo等對漢黃岑素的抗HBV活性進行了研究，明顯其可抑制HBV與宿主肝細胞的細胞融合（阻斷病毒侵入與釋放），同事具有抑制HBV逆轉錄酶（RT）的活性以及抑制HBsAg、HbcAg、HBeAg的表達。此外研究還發現，黃岑苷能夠有效地抑制HepG2.2.15細胞分泌HBV病毒抗原，提示黃岑苷可用于抗HBV治療。近年，國內已有黃岑苷上市，據初步研究顯示，黃岑苷聯合其他抗病毒藥物抗HBV治療對HBV DNA的下降及HBeAg血清轉換具有協同作用，明顯優于單藥抗HBV治療，且患者耐受良好。然而，目前關于黃岑苷單藥抗HBV治療的報道較少，且聯合其他藥物抗病毒治療的臨床樣本較少，故仍需隨機、大樣本的臨床研究驗證。 

    刺槐（Acacia） 

    刺槐屬于豆科樹種，作為中草藥，其皮、花及心材具有抗氧化、抗炎癥等作用。臺灣的一項研究發現，刺槐n-丁醇甲醇提取物能夠抑制HCV復制評價體系中HCV RNA的復制；在HCV復制子報告體系中和IFN-α、特拉匹韋（Telaprevir）、2’-C-甲基胞苷（2’-C-methylcytidine）聯合用藥時均具有協同效應。進一步研究表明，該提取物通過下調核轉錄因子kB(NF-kB)的活性來抑制并降低環氧化酶-2（COX-2）的表達，從而抑制HCV RNA的復制。據此推測，刺槐可作為HCV感染者的保護性治療藥物。 

    樺樹皮提取物（Birch Bark Extract） 

    樺樹皮為樺木科植物白樺的外皮，藥用價值很廣，近年來，收到國內外學者的廣泛重視。樺樹皮化學成分復雜、藥理作用多樣，其提取物具有抗菌、抗腫瘤、降脂、利膽和保肝等作用。最近，Shikov等研究發現，樺樹皮提取物除了具有保肝作用外，還具有抗HCV作用（表1）。研究顯示，樺樹皮提取物治療慢性丙肝炎可顯著降低HCV RNA，這可能與抑制HCV與宿主肝細胞的細胞融合（阻斷病毒侵入與釋放）有關，但具體抗病毒機制尚需進一步研究。Freysdottira等的一項研究發現，樺樹皮提取物可以調整突狀細胞與T細胞之間的相互作用，從而導致宿主免疫反應，而已知T細胞特別是細胞毒性T細胞（CTL）在抗病毒方面具有重要作用。這就為今后研究樺樹皮的抗病毒機制提供了一個研究方向。 

    水飛薊素（Silymarin） 

    中藥水飛薊素系由水飛薊草種子提取的黃體甙，具有增強肝細胞穩定性，并可促進肝細胞再生的作用；國外常用于毒蕈中毒所致肝衰竭。近年研究顯示，水飛薊素具有抗HCV作用。2007年的一項研究對高度標準化的水飛薊提取物在人體細胞中的抗炎癥和抗病毒效應進行了評估。結果證實，水飛薊素通過抑制人肝癌細胞中NF-kB的轉錄激活，以及人外周血單個核細胞中炎癥因子的活化來發揮抗炎癥作用；同事也提示，水飛薊素尤其是聯合IFN-α治療時，對HCV感染具有預防和治療效果。 

    水飛薊賓是水飛薊素的主要活性成分之一。Ferenci等將PEG-IFN-α+利巴韋林（RBV）無應答的丙型肝炎患者分成兩組進行臨床抗病毒研究，一組接受水飛薊賓，10 mg.kg-1.d-1，靜注7d 并治療后第8天試用PEG-IFN-α+RBV治療；另一組分別接受水飛薊賓5 mg.kg-1.d-1 、10 mg.kg-1.d-1 、15 mg.kg-1.d-1 、和20 mg.kg-1.d-1 ，靜注14 d，并在治療第8天聯合PEG-IFN-α+RBV綜合治療。第一組研究結果顯示，靜注水飛薊賓后HCV RNA較基線顯著下降（1.32±0.55）log IU/mL（P<0.001），停用水飛薊賓后盡管試用了PEG-IFN-α+RBV，仍有6例患者出現HCV RNA的再度升高。第二組研究結果表明，靜注水飛薊賓后HCV RNA下降呈劑量依賴性，水飛薊賓5 mg.kg-1.d-1 （n=3）、10 mg.kg-1.d-1 （n=19）、15 mg.kg-1.d-1 （n=5）和20 mg.kg-1.d-1 （n=9）靜注7d后HCV RNA較基線下降水平逐漸升高，下降值分別為（0.55±0.5）log IU/mL、（1.41±0.59）log IU/mL、（2.11±1.34）log IU/mL和（3.02±1.01）log IU/mL。結果提示，水飛薊賓對抗HCV無應答者具有較強的抗病毒作用，與PEG-IFN-α+RBV聯合使用也取得較好效果，且在治療過程中除了個別患者出現輕微的胃腸道癥狀外，尚未發現其他不良反應，其耐受性良好。然而，此臨床研究樣本較少，尚需大樣本的隨機臨床研究驗證。近來的一項研究顯示，水飛薊賓具有抑制HCV RNA依賴的RNA聚合酶的功能，可有效抑制HCV RNA及全基因組丙型肝炎病毒JFH-1的復制。提示其可作為特殊的抗HCV藥物。 

    新近美國西雅圖華盛頓大學Wagoner等也進一步研究了水飛薊素的抗病毒活性，結果發現，水飛薊素對于HCV細胞培養具有抗病毒感染的作用，表現在抑制病毒入侵、抑制RNA和蛋白表達以及抑制傳染性病毒顆粒的生成等方面。研究發現，水飛薊素并不直接阻斷培養的HCV感染細胞結合正常細胞，但其通過抑制多種病毒假顆粒的入錢及HCV假顆粒與脂質體的融合，來發揮抗病毒感染的作用。本研究中值得注意的一個發現是水飛薊素和水飛薊賓對HCV NS5B-RNA依賴的RNA多聚酶活性的抑制作用不同，同樣使用體外抗病毒有效劑量的5~10倍時，水飛薊素能抑制基因2a型JFH-1 NS5B-RNA依賴的RNA多聚酶活性，但水飛薊賓卻僅顯示出極輕微的抑制作用。在該研究中，水飛薊素被發現能抑制微粒體甘油三酯轉運蛋白、載脂蛋白B分泌，抑制培養上清液感染性病毒顆粒的產生，同事也具有阻斷細胞細胞間病毒傳播的作用。以上研究表明，盡管在體外實驗中水飛薊素已經被證實具有抑制NS5B聚合酶活性的作用，但其抗病毒的機制還包括阻斷病毒對宿主細胞的入侵及細胞間的傳播。 

    理想的抗HBV和HCV藥物應具備以下條件：①具有強效抑制病毒復制的能力；②具有良好的安全性，可長期用藥；③作用持久，停藥物無復發；④耐藥變異幾率低；⑤可激發宿主自身的抗病毒免疫活力；⑥可最終清除病毒。然而，迄今為止國內外尚無理想的抗HBV和HCV藥物，多數價格昂貴、療程長、不良反應多、停藥后可發生反彈，且臨床療效遠遜于理論設計。因此，上述提出的抗HBV和HCV的新藥物新療法，可能會克服病毒耐藥等問題，且為抗病毒治療提供了更多的藥物選擇。不過，目前研究結果是初步的，仍需大量臨床研究驗證。 

    以上來源：王宇明。《中藥抗HBV和HCV研究新進展》�！秶�際肝病》。2012年1月第1期

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