高效液相色譜法測定環孢素軟膠囊的含量

    環孢素膠囊收載于USP 23版，其含量測定方法采用二甲基硅烷鍵合硅膠柱(L 柱)，國內無此柱生產供應，因此國內藥廠開發該藥時，含量測定做了國產化研究工作，在常用的C。 柱上分離溯定環孢素的含量。環孢素膠囊為軟膠囊，內含植物油、表面活性劑等輔料，對環孢素含量測定易產生干擾，復核檢驗中發現按衛生部試行標準?檢驗，在環孢素出峰位置，有一輔料干擾峰存在(約占主成分峰峰面積的3％)，見圖1。本文通過試驗，改進了環孢素膠囊含量測定的色譜條件，有效地排除了干擾，實驗結果滿意。 

    儀器與試藥日本島津LC一6A液相色譜儀，配有SPD一6AV型檢測器，SCL一6B型系統控制器，C—R4A型色譜數據處理機。環孢素對照品，由本所標化；環孢素膠囊，由浙江瑞邦太藥廠提供；乙腈、甲醇為色譜純試劑。 

    空白輔料不干擾環孢素的含量測定。環孢紊(環孢菌素A組分)的保留時間為15．On面，環孢菌素B、D組分的保留時間分別為11．0min、20．8min，不干擾環孢素的測定。 

    供試品溶液穩定性本品用乙腈一氯仿(4：1)溶液溶解后立即進樣，測得主峰峰面積為1022853。鵪小時后再進樣測定，主峰面積為1022365，說明供試品溶液穩定。 

    含量測定精密稱取本品約0，12g，置10ml量瓶中，用乙腈一氯仿(4：1)溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液，照上述色譜條件．精密量取l0m，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，量取峰面積；另取環孢素對照品約10mg，精密稱定，置10ml量瓶中，同法稀釋、測定，按外標法計算，即得。含量測定結果(標示量百分數，n=2)：本法970602、971212、980612批分別為97．3％、99，7％、103．1％，衛生部法970602、971212批分別為100．5％ 、102，7％ 

    在NOVA—PAK C。 柱上， 以乙腈一水一甲醇一磷酸(550：400：50：0．5)為流動相，檢測波長從210ran逐漸增大，輔料干擾峰逐漸減少，至225nm時基本上消失。檢測波長從210ran增大到225nm，輔料干擾峰峰面積降低40倍，環孢素峰峰面積降低2．5倍，環孢素的檢測靈敏度雖然有所下降，但檢測靈敏度仍然較高，足以滿足含量測定要求，線性關系良好，因此確定檢測波長從衛生部試行標準中的210nnl改為225nm。從圖1、圖2對比色譜圖，及“2，6”對比含量測定結果可知，本法有效地排除了輔料干擾峰的干擾。 

    柱溫對環孢素峰形影響較大，室溫下色譜峰較寬，柱溫升高色譜峰變窄，但柱溫過高影響色譜柱的壽命，測定時儀器也不容易穩定，因此確定柱溫為50 。

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