血管內(nèi)皮生長因子與轉(zhuǎn)化生長因子β在人動脈粥樣硬化病灶中的表達(dá)

　　動脈粥樣硬化斑塊中，血管增多是其重要的病理學(xué)特征。隨著研究的逐步深入，認(rèn)為血管內(nèi)皮生長因子（vascular endothelial growth factor，VEGF）是目前已知最強(qiáng)、最主要的誘導(dǎo)血管發(fā)生的生長因子，還能誘導(dǎo)其他細(xì)胞因子的表達(dá)增強(qiáng)及表達(dá)VEGF受體的單核細(xì)胞的遷移［1］。幾乎所有參與動脈粥樣硬化發(fā)生發(fā)展的生長因子如轉(zhuǎn)化生長因子（transforming growth factor-β，TGF-β）都能上調(diào)平滑肌細(xì)胞（SMC）、巨噬細(xì)胞和其他細(xì)胞中VEGF的表達(dá)［2］。我們應(yīng)用免疫組織化學(xué)SP法，分別檢測VEGF和 TGF-β在人冠狀動脈粥樣硬化中的表達(dá)情況，以分析它們在動脈粥樣硬化中的作用和意義。

　　1 材料與方法

　　1.1 材料 收集47例2004~2005年尸檢冠狀動脈蠟塊標(biāo)本，年齡21~70歲，平均（46.6±16.2）歲。

　　1.2 常規(guī)病理學(xué)檢查及分組 將HE染色切片在顯微鏡下觀察，根據(jù)其基本病變的形成將病例分為3組：正常組11例，脂紋期8例，斑塊期28例。

　　1.3 試劑 兔抗人VEGF多克隆抗體及兔抗人TGF-β多克隆抗體均購自武漢博士德生物工程有限公司，SP超敏試劑盒購自福州邁新生物技術(shù)開發(fā)公司。三種抗體均為濃縮型，其工作濃度為1∶100。

　　1.4 免疫組織化學(xué)檢測 將蠟塊連續(xù)切片，采用SP法染色后，顯微鏡下觀察結(jié)果。在胞膜或胞漿處有棕黃色或棕褐色顆粒狀物質(zhì)，呈網(wǎng)格狀或環(huán)狀沉淀者為陽性細(xì)胞［3］。在高倍顯微鏡下（10×40）任選10個(gè)視野，分別計(jì)數(shù)VEGF和TGF-β的陽性細(xì)胞數(shù)，計(jì)算平均值。

　　1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 應(yīng)用SPSS 10.0統(tǒng)計(jì)軟件中的秩和檢驗(yàn)及相關(guān)檢驗(yàn)。

　　2 結(jié)果

　　2.1 VEGF和TGF-β在冠狀動脈中的分布特點(diǎn) VEGF在SMC和巨噬細(xì)胞中有表達(dá)，在斑塊中表達(dá)最高。TGF-β在內(nèi)皮細(xì)胞（EC）、SMC和成纖維細(xì)胞中有表達(dá)，在脂紋期表達(dá)最高。

　　2.2 冠狀動脈中表達(dá)VEDF和TGF-β的陽性細(xì)胞數(shù) 在冠狀動脈粥樣硬化病變各期中，VEGF的表達(dá)呈遞增趨勢，其陽性細(xì)胞數(shù)在斑塊期最多，與正常組比較差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。TGF-β的陽性細(xì)胞數(shù)在脂紋期最多，各期與正常組相比均差異有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）。

　　2.3 VEGF與TGF-β表達(dá)的相關(guān)性 對全部病例VEGF與TGF-β的表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性檢驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)兩者的表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.35，P＜0.01）。

　　3 討論

　　動脈粥樣硬化是嚴(yán)重影響人類健康的疾病之一，其發(fā)病機(jī)制越來越受到人們的關(guān)注。近年來，研究表明生長因子在動脈粥樣硬化中的作用日益突出，但VEGF和TGF-β在人動脈粥樣硬化病灶中的變化報(bào)道甚少［4］。

　　作為動脈血管壁主要細(xì)胞成分的血管平滑肌細(xì)胞（VSMC）含有VEGF基因［5］。動脈粥樣硬化狀態(tài)下，VSMC在諸多因素的作用下，可由收縮型轉(zhuǎn)化為分泌型，分泌VEGF。本實(shí)驗(yàn)表明，在動脈粥樣硬化斑塊中SMC和巨噬細(xì)胞都有VEGF的強(qiáng)表達(dá)，VEGF陽性細(xì)胞數(shù)目與內(nèi)膜血管化程度呈正相關(guān)，且VEGF陽性細(xì)胞的分布與新生血管的分布高度一致，即主要位于斑塊肩部與纖維帽部位。因此，VEGF在血管壁血管發(fā)生中處于十分重要的地位［6］。

　　TGF-β與VSMC的遷移和增殖密切相關(guān)，是血管動脈粥樣硬化形成和發(fā)展的促進(jìn)因子和增強(qiáng)因子［7］。其最明顯的生物學(xué)特征是促進(jìn)VSMC的遷移、增殖和在血管壁細(xì)胞外基質(zhì)沉積。通過促進(jìn)VSMC表型轉(zhuǎn)化和增殖，刺激VSMC合成膠原增多，從而加速動脈粥樣硬化發(fā)生、發(fā)展的過程。本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，TGF-β在VSMC、EC和成纖維細(xì)胞中為陽性，主要位于核周的胞漿中，與VEGF的表達(dá)具有相關(guān)性。說明TGF-β可能具有促進(jìn)VSMC分泌VEGF增加的作用。

　　總之，動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展是一個(gè)復(fù)雜的過程。本研究表明，動脈粥樣硬化病灶中VEGF、TGF-Β的表達(dá)增加，且具有相關(guān)性，提示二者可能參與動脈粥樣硬化的發(fā)生發(fā)展。如能進(jìn)一步從基因水平研究二者在動脈粥樣硬化形成中的機(jī)制，必將對動脈粥樣硬化的預(yù)防和治療起到巨大的推動作用。（參考文獻(xiàn)：血管內(nèi)皮生長因子與轉(zhuǎn)化生長因子β在人動脈粥樣硬化病灶中的表達(dá)，梁 萍，中華現(xiàn)代內(nèi)科學(xué)雜志2007年第4卷第11期）

TAG：血管內(nèi)皮生長因子與轉(zhuǎn)化生長因子β在人動脈粥樣硬化病灶中的表達(dá) 動脈粥樣硬化