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金克專題 >> 金克槐耳顆粒對胃癌細胞的抑制作用
金克槐耳顆粒對胃癌細胞的抑制作用
- 來源： 百濟新特藥房網 發布時間：2011-6-2 17:56:28
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實驗結果表明，MTT法檢測1．5 g／L金克作用36 h達到最佳抑制32．56％，同時，在該藥物濃度，時間Sub—G1法檢測金克誘導MKN- 28細胞凋亡率33． 46％，均高于30％。金克對誘導MKN．28細胞的凋亡作用介于低度和中度敏感。
研究討論，四唑鹽快速比色法( MTT法) 是一種檢測細胞存活和生長的方法。1 9 8 3年Mo s sman根據細胞能量代謝水平與DNA合成水平相平行的原理，建立了四唑鹽比色法。由于活細胞線粒體內的琥珀酸脫氫酶能脫下琥珀酸氫原子，使其氧化成延胡索酸。而MTT作為脫下氫原子的接受劑被還原成藍紫色的甲簪，反應產物甲簪顏色與活細胞成正比。凡具有代謝活性的細胞無論處于靜止期還是分裂期，都有還原MTT的作用，而死細胞和紅細胞則沒有這種能力。利用此原理測定抗腫瘤藥物作用于腫瘤細胞的變化并計算出藥物對腫瘤細胞的抑制率。
自MTT法應用于抗腫瘤藥物敏感性實驗以來其以簡單、快速、敏感性好等優點而被臨床和科研廣泛應用。但作為一種新的方法仍存在一些問題，如( 1 )三個平行孔之間的吸光度值的標準差平均值為0．08，對腫瘤細胞抑制率越高則吸光度值越低，同樣誤差情況下，結果產生的差異相對越大，所獲結果就會高于實際敏感性結果。( 2 ) 某些有色藥物易影響酶標儀的檢測結果造成假陰性。( 3 ) 反應產物甲簪的溶解劑的不穩定性也會影響結果的精確度。( 4 ) 研究人員發現絲裂霉素作用 3天后的死細胞中仍保留了活細胞 2 4 ％的琥珀酸脫氫酶活性，使甲簪產量偏高，這也會影響MTT法的靈敏度。本實驗中使用的藥物金克為有色藥物，在實驗過程中使用孔板離心機去上清的方法除去有色液體，重懸細胞排除藥物顏色對實驗結果的干擾而使實驗結果更為精確。
細胞凋亡( apoptosis，Ap) 是不同于壞死( necro- sis )的一種自主的程序性自殺性死亡( progra mmed celldeath，PCD)。在細胞凋亡晚期，細胞內核酸內切酶激活，并在核小體間切割D N A鏈，使 D N A降解為以核小體(200bp)為單位的片段。細胞被固定后，小分子D N A片段由胞內滲出，細胞內DNA含量明顯降低，在G1期峰前以Sub．G1峰的形式出現而被識別 曲。由此原理建立的Sub．G1法因其操作簡便快捷且費用低而得到廣泛應用。但對于早期凋亡細胞而言，斷裂的DNA片段較少或片段較大，DNA因而滲出較少，故應用Sub-G1法無法檢測到早期凋亡細胞，且其不能準確地分析細胞凋亡的周期時相性。因此，Sub-G1法的應用具有一定的局限性。
Nakazato 等將根治性切除胃癌病例 ( n=262例)，術后隨機分為單純化療組( MMC+5-FU)和免疫化療組( MMC+5-F U+槐耳顆粒) 進行試驗，所有病例隨診5年以上，發現免疫化療組的5年無病生存率 7 0．7 ％，而單純化療組僅為59．4％，兩組之間差異有顯著性( P<0．0 1 )。總之，MTT法和Sub-G1法是兩種快捷、有效檢測藥物作用的方法，同時金克能直接誘導腫瘤細胞凋亡，提高機體的免疫力，對機體無毒副作用，對中晚期腫瘤患者能明顯改善存活率。金克對于胃癌細胞的抑制作用介于低度敏感和不敏感之間，但是能增強免疫，無明顯毒副作用，具有極大的臨床應用前景。
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