多吉美臨床前動物藥代動力學研究

在Wistar大鼠，CD－1小鼠和比格犬，體內(nèi)試驗考察了Sorafenib（BAY43－9006）以甲苯磺酸鹽形式（BAY54－9085）給藥的藥代動力學。另外，在包括人在內(nèi)的各物種，體外試驗評價了本品與血漿蛋白的結(jié)合，以及本品在血細胞/血漿中的分布和代謝。

在大鼠和小鼠，[¹⁴C]標記的Sorafenib以及/或其放射活性代謝產(chǎn)物幾乎完全吸收，在犬為部分吸收（68%）。原藥的絕對生物利用度為中到高度（在犬為60%，在大鼠和小鼠為80%）。在大鼠（0.044L/[kg.h]）的血漿消除率明顯低于小鼠和犬（0.13－0.15L/[kg.h]）。在大鼠，小鼠和犬Vss數(shù)值適中，約為0.7L/kg。血漿中原藥的消除半衰期與給藥途徑無關(guān)；在大鼠約為9小時，小鼠為6小時，犬為4小時。

Sorafenib與蛋白高度結(jié)合且與物種有關(guān)，幾乎在所有器官和組織中，放射活性的分布迅速而均勻，穿越血/腦屏障的能力為低到中度。在大鼠的器官和組織，放射活性未見任何不可逆或持久性結(jié)合。[¹⁴C]標記的Sorafenib和/或其放射標記的代謝產(chǎn)物穿過胎盤屏障的能力為中度，而且明顯分泌到哺乳期大鼠的乳汁中。

Sorafenib并未對主要的CYP異構(gòu)體產(chǎn)生誘導作用。在體外發(fā)現(xiàn)Sorafenib對CYP異構(gòu)體（如CYP2B6，2C8和2C9）以及UDP－葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶UGT1A1和1A9具有抑制作用。比較各動物物種在體外肝微粒體培養(yǎng)試驗的結(jié)果發(fā)現(xiàn)：在人，猴和小鼠，N－氧化反應(yīng)（M－2）最為突出，而在大鼠和犬，居優(yōu)勢地位的是經(jīng)N－甲基羥基化作用生成M－3。在人體內(nèi)，CYP3A4是催化Sorafenib的代謝途徑I（氧化代謝）的關(guān)鍵酶。除代謝途徑I之外，在人體肝細胞內(nèi)尚能形成Sorafenib葡糖苷酸（M－7）。Sorafenib的葡糖苷酸化經(jīng)由UDP－葡糖醛酸轉(zhuǎn)移酶（UGT）1A9催化。

口服給藥后，原藥是大鼠，犬和人血漿中的主要組分。在大鼠和犬的血漿中，M－3（BAY72－1973）是主要代謝產(chǎn)物，但在人血漿中，M－2居優(yōu)勢地位。在人體血漿中，放射活性總量和Sorafenib進入肝腸循環(huán)。在人和大鼠，Sorafenib是糞便提取物中的主要組分。羧酸化M－6是大鼠，犬和人體內(nèi)主要的代謝產(chǎn)物。比較Sorafenib在人體和動物體內(nèi)的生物轉(zhuǎn)化發(fā)現(xiàn)，兩條代謝途徑在體外和體內(nèi)存在顯著差異。在人體外和體內(nèi)試驗中，吡啶的N－氧化作用（M－2，BAY67－3472）明顯優(yōu)于甲基羥基化作用（M－3，BAY72－1973）。葡糖苷酸化反應(yīng)僅在人體內(nèi)Sorafenib的生物轉(zhuǎn)化中占有重要地位。

與大鼠和犬相比，在人體內(nèi)經(jīng)腎臟排泄的放射活性更為顯著，這是因為經(jīng)尿排泄的Sorafenib葡糖苷酸M－7的生成與物種有關(guān)。在大鼠和犬，放射活性主要經(jīng)膽管/排泄物排泄；經(jīng)尿排泄量較低。在大鼠，給藥后72小時內(nèi)放射活性幾乎完全消除。

在放射標記的Sorafenib進行的試驗中，[¹⁴C]BAY43-9006及其甲苯磺酸鹽[¹⁴C]BAY54－9085的2－吡啶酰胺基團以[¹⁴C]標記⁽⁵⁰⁾。在藥代動力學試驗中，使用液體閃爍計數(shù)法（LSC）分析了血樣中與受試物質(zhì)有關(guān)的放射活性總量；使用聯(lián)有無線檢測或紫外檢測器的高效液相色譜儀（HPLC）檢測原藥及其代謝產(chǎn)物水平。使用液體閃爍計數(shù)儀（LSC）分析尿樣和糞便樣品中的放射活性

試驗研究了幾種經(jīng)驗證的LC－MS/MS分析方法，用于檢測不同物種血漿中Sorafenib（BAY 43-9006）及其代謝產(chǎn)物BAY72－1974 (M-1), BAY 67-3472 (M-2),BAY72－1973（M－3），BAY 43-9007 (M-4)和BAY 68-7769 (M-5)⁽⁵¹⁾。檢測Sorafenib的不同方法的定量限（LOQ）介于0.5－10µg/L之間，精密度<15%，準確度范圍在93%和114%之間。動物血漿中的Sorafenib在 -70^oC下貯存至少3個月仍然穩(wěn)定。

除在移植了人Colo－205結(jié)腸癌的裸鼠⁽⁴⁰⁾給藥劑量為30mg/kg外，在CD－1小鼠⁽⁵²⁾，Wistar大鼠⁽⁵³⁾和比格犬⁽⁵⁴⁾，考察在3.5－4.1mg/kg劑量下，Sorafenib（以Sorafenib甲苯磺酸鹽BAY 54－9085形式給藥）的吸收和基本藥代動力學。在多數(shù)試驗中本品為口服給藥，因為在臨床試驗中給藥途徑為口服，僅在生物利用度試驗中為靜注（IV）給藥。

在CD－1小鼠和Wistar大鼠，Sorafenib幾乎為完全吸收，但在比格犬僅部分吸收。在三種動物進行的評價試驗中，口服藥物后1.5－2h之間的最大血藥濃度顯示放射活性（[¹⁴C]標記的Sorafenib甲苯磺酸鹽和代謝產(chǎn)物）的吸收速度為中速。在犬的生物利用度為59%，在大鼠和小鼠約為80%。口服給藥后，Sorafenib原藥在小鼠的終末端消除半衰期為6h，在大鼠為9h，犬為4h。大鼠血漿中總消除率（0.044L/[h·kg]）明顯低于小鼠（0.15L/[h·kg]）或犬（0.13L/[h·kg]）。Vss數(shù)值在三種動物十分相似（范圍在0.65L/kg－0.74L/kg）。

在患有腫瘤的NCr－裸鼠，本品在血漿和腫瘤組織中的暴露量，即AUC和Cmax在第一天和第四天相似。在這兩天，腫瘤中的暴露量比血漿高出約兩倍。

 

體外試驗分析了Sorafenib在稀釋血漿和固體支撐液膜（Trans il®）內(nèi)的分布，研究了Sorafenib與小鼠，大鼠，兔，犬和人血漿蛋白的結(jié)合⁽⁵⁵⁾。Sorafenib與血漿蛋白高度結(jié)合且與物種有關(guān)。在人，大鼠和小鼠血漿中，未結(jié)合部分約為0.5%，在犬為0.89%，兔為2%。在大鼠，犬和人的血液中，Sorafenib在血漿和血細胞中的分布大致相等。

Sorafenib可與各種血漿蛋白高度結(jié)合。主要的結(jié)合蛋白有人血清白蛋白， α－β－球蛋白和低密度脂蛋白（LDL），未結(jié)合部分在1.02%－3.55%之間。α－酸性糖蛋白和γ球蛋白在血漿蛋白結(jié)合中并不十分明顯。在人和大鼠血漿中，本品與血漿蛋白的結(jié)合完全可逆。

在雄性和雌性Wistar大鼠以及雄性有色Long Evans大鼠，通過整體放射性自顯影技術(shù)對分布方式進行了定性⁽⁵⁷⁾和定量⁽⁵⁸⁾分析。除了大腦，精囊和成骨，放射性同位素標記的Sorafenib和/或其代謝產(chǎn)物在體內(nèi)分布均勻。分布方式與給藥途徑和性別無關(guān)。在多數(shù)器官和組織，給藥后4h達到最大濃度。穿越血/腦屏障的能力為低到中度。總之，在器官和組織中未見任何不可逆的，持久性放射活性數(shù)據(jù)。

在大鼠，Sorafenib和/或其代謝產(chǎn)物穿越胎盤屏障的能力為中度⁽⁵⁹⁾。在胎兒的平均暴露量達到母體血液中的52%。Sorafenib在胎兒的多數(shù)組織和器官內(nèi)均勻分布，但是在胎兒任一組織或器官，Cmax和AUC_(0－24h)暴露量均未超過母體血液中的相應(yīng)數(shù)值。同樣，在胎兒器官中的暴露量通常低于母體相應(yīng)器官內(nèi)的濃度，唯一的例外是在胎兒大腦，暴露量比母體大腦高2.3倍。24小時后在懷孕的大鼠檢測到給藥劑量的54.4%，主要存在于母體，胎兒僅有1.8%。

在哺乳期大鼠，32小時內(nèi)乳汁中的回收量為給藥劑量的27.3%⁽⁶⁰⁾。在乳汁中放射活性AUC高于母體血漿，乳汁與血漿之比為4.9。